Długoterminowe bezpieczeństwo i skuteczność terapii genowej czynnika IX w hemofilii B AD 2

Bezobjawowe, przejściowe zwiększenie aktywności enzymów wątrobowych w surowicy, prawdopodobnie w wyniku komórkowej odpowiedzi immunologicznej na kapsyd AAV8, obserwowano u dwóch pacjentów, którzy otrzymali wysoką dawkę wektora. Ta komplikacja nie została zaobserwowana w modelach zwierzęcych.12 Tutaj przedstawiamy informacje na temat trwałości ekspresji terapeutycznego transgenu i długoterminowych wyników klinicznych transferu genów za pośrednictwem AAV w leczeniu hemofilii B. Ponadto, opisujemy spójność zależności dawka-odpowiedź w rozszerzonej dawkę kohortową, a także częstość i kinetykę podwyższonych enzymów wątrobowych. W tej małej podgrupie pacjentów informujemy również o późnych toksycznych zdarzeniach.
Metody
Badaj pacjentów
W sumie 10 mężczyzn z ciężką hemofilią B otrzymało pojedynczą dawkę wektora scAAV2 / 8-LP1-hFIXco, podawaną przez żyłę obwodową, zgodnie z protokołem badania9. Kryteria kwalifikacji i plan badań są przedstawione w Tabele S1 i S2, odpowiednio, w dodatkowym dodatku (dostępne wraz z pełnym tekstem tego artykułu na stronie). Brak wykrywalnych przeciwciał przeciwko białku kapsydu AAV8 był krytycznym kryterium naboru 9 (więcej szczegółów w Dodatku uzupełniającym).
Dwie oddzielne partie wektora scAAV2 / 8-LP1-hFIXco zostały wyprodukowane przez Children s GMP w Memphis, Tennessee i scharakteryzowano, jak opisano wcześniej. 9-11,13. Miano wektora oznaczono za pomocą ostatnio opisanego testu na bazie żelu. .14 W początkowej grupie badanej sześciu pacjentów było kolejno zapisywanych od marca 2010 r. Do stycznia 2011 r. W celu otrzymania jednej z trzech dawek wektora – małej dawki (2 × 1011 genomów wektorowych [vg] na kilogram masy ciała), dawki pośredniej ( 6 × 1011 vg na kilogram) lub wysoką dawkę (2 × 1012 vg na kilogram) – u dwóch pacjentów w każdej kohorcie dawki. Wcześniejsze wyniki dla tych pacjentów zostały odnotowane wcześniej.9 Kolejnych czterech pacjentów zapisano między lutym 2012 r. A grudniem 2012 r .; każdy otrzymał wysoką dawkę. Wszyscy pacjenci wyrazili pisemną świadomą zgodę.
Oceny bezpieczeństwa i skuteczności
Po wlewu dożylnym monitorowaliśmy aktywność czynnika IX w osoczu, uwalnianie wektora oraz humoralne i komórkowe odpowiedzi immunologiczne przeciwko kapsydowi i czynnikowi IX, oprócz wykonywania rutynowych badań laboratoryjnych. 15 Użyliśmy standardowego, jednoetapowego testu aktywowanego częściowego -tromboplastynę w celu oceny aktywności krzepnięcia czynnika IX i testu immunologicznego do pomiaru poziomów antygenu. (Szczegółowe informacje na temat tych testów znajdują się w Dodatku Uzupełniającym.) Korzystając z potwierdzonych zapisów dotyczących pacjentów, obliczyliśmy roczną liczbę epizodów krwawienia i ilość koncentratu czynnika IX, którą podawano jako leczenie profilaktyczne.
Wyniki badań
Pierwszorzędowym wynikiem badania było bezpieczeństwo wlewu dożylnego w trzech różnych dawkach. Oceniliśmy skuteczność (wynik wtórny), analizując trzy pomiary: aktywność czynnika IX (mierzoną co najmniej 10 dni po ostatniej dawce koncentratu czynnika IX), roczną liczbę epizodów krwawienia i roczną ilość koncentratu czynnika IX, która była podawany.
Analiza statystyczna
Zastosowaliśmy jednopróbkowe testy podpisów z oceną Wilcoxona w celu ustalenia, czy istniała istotna różnica w rozkładach rocznej liczby epizodów krwawienia i zastosowaniu koncentratu czynnika IX rok przed przeniesieniem genu, w porównaniu z rokiem po przeniesieniu genu. Analizy były ograniczone do danych z tych okresów, aby zapewnić, że dane będą kompletne dla wszystkich pacjentów, ponieważ większość pacjentów, którzy byli leczeni w kohorcie z wysoką dawką, obserwowano przez nieco ponad rok. Jednakże, podajemy podsumowanie rocznej liczby epizodów krwawienia i stosowania czynnika IX przez dłuższy czas obserwacji (do 3 lat) dla sześciu pacjentów w początkowej kohorcie zwiększania dawki.
Wyniki
Pacjenci
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka pacjentów na linii podstawowej i po przeniesieniu genów, zgodnie z dawką wektora. Spośród 10 pacjentów z ciężką hemofilią B, którzy zostali włączeni do badania, wszyscy mieli negatywne wyniki testu na ludzki wirus niedoboru odporności (Tabela 1). Wszyscy pacjenci z wyjątkiem Pacjenta 7 mieli po szczepieniu dowód na serologiczną odporność na antygen powierzchniowy wirusa zapalenia wątroby typu B. Wszyscy pacjenci z wyjątkiem pacjentów 1, 4 i 6 mieli dowody wcześniejszej infekcji wirusem zapalenia wątroby typu C (HCV), na podstawie testów, które były pozytywne dla przeciwciał HCV, ale negatywne dla HCV RNA.
Wlew ogólnoustrojowy scAAV2 / 8-LP1-hFIXco nie był związany z istotnymi klinicznie zmianami pulsu, częstości oddechów, ciśnienia krwi lub temperatury podczas wlewu dożylnego lub po nim (ryc.
[przypisy: Pompy insulinowe, usuwanie blizn potrądzikowych, dentysta olsztyn ]

Powiązane tematy z artykułem: dentysta olsztyn Pompy insulinowe usuwanie blizn potrądzikowych